銅檢測試劑盒(Cuprizone 微板法)操作説明

銅檢測試劑盒(Cuprizone 微板法)

產品簡介：

銅是人體重要的微量元素，是酶的重要組成部分如銅藍蛋白(亞鐵氧化酶)、超氧化物歧化酶、

細胞色素氧化酶等，總含量約為 90mg，有 90~95%的銅與球蛋白結合，形成銅藍蛋白，5~10%的銅

與清蛋白結合，清蛋白可作為血漿銅的載體，銅的檢測方法有分光光度計、原子吸收光譜法、中

子活化分析法等。

雅吉生物銅檢測試劑盒(Cuprizone 微板法)檢測原理是在酸性介質中與白蛋白結合的銅從

白蛋白中解離出來，經沉淀蛋白質后銅離子與 Cuprizone 絡合，形成穩定的藍色絡合物，通過酶

標儀測定 620nm 處吸光度，形成的藍色與血清、血漿銅成線性關系，與標準品比較，根據公式計

算出銅含量，該檢測試劑盒在 62.8μmol/L 以下線性關系良好，特異性高，較為靈敏。該試劑

盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

該試劑盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。 產品組成：

名稱 100T Storage

試劑(A):銅標準(100μg/ml) 1ml 4℃避光

試劑(B):銅標準稀釋液 5ml RT

試劑(C):CU 酸化液 15ml 4℃

試劑(D):Lea 蛋白沉淀液 25ml 4℃避光

試劑(E):Cu Assay Buffer 2x10ml 4℃

試劑(F):Cuprizone 顯色液 1.2ml 4℃避光

試劑(G):ddH2O 10ml RT

自備材料：

1、酶標儀、96 孔板

2、1.5ml 離心管或試管

3、離心機

操作步驟(僅供參考)：

1、制備樣品∶血漿、血清按照常規方法制備，可以直接用于該試劑盒的測定，

-20℃凍存，用于 Cu 的檢測。

2、配制銅標準工作液︰取適量的銅標準(100μg/ml)，按銅標準(100μg/ml)∶

銅標準稀釋液=1:24 的比例配制銅標準(4μg/ml)，即為銅標準工作液;4℃避光

保存，3 個月有效。

3、Cu 加樣∶最好選用經稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無菌

聚乙烯 1.5ml 離心管，以及潔凈 96 孔板，如果無法達到上述要求，應盡量避免

使用銅污染的器皿，按下表操作。

4、Cu 測定∶混勻，室溫靜置 20min，以空白調零，酶標儀 620nm 處測定標準孔

和測定孔的吸光度(即為 A 標準和 A 測定)。

計算:

血漿、血清銅(μmol/L)=(A 測定/A 標準）×62.8

式中∶A 測定=測定管的吸光度

A 標準=標準管的吸光度

銅標準(4μg/ml)=銅標準(62.8μmol/L)

μg/dl=μmol/L/0.157

參考區間∶

成年健康人血清銅︰

男性∶10.99~21.98μmol/L(70~140μg/dl)

女性∶12.56~23.55μmol/L(80~150μg/dl)

注意事項∶

1、如果樣品濃度過高，應用去離子水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。

2、實驗過程中用到的水，不可用普通的蒸餾水，盡量采用高純度的去離子水。

3、玻璃器材盡量用 10%的鹽酸浸泡 24h，取出后用去離子水沖洗后才可以使用。

4、試驗中儀器、試管、注射器等盡量避免銅污染。

5、測定波長可選 600~640nm，檢測結果差異不大。

6、該試劑盒呈色穩定，顯色后在 4~20℃可穩定 1h。

7、隨著時間的延長，顏色會變淺或消失，應在 1h 內檢測完畢。

8、Cu Assay Buffer 應密閉保存，用完立即蓋緊蓋子，防止有效成分揮發。

9、經典標準品采用銅標準(2μg/ml)，如儀器精密干擾小，可以采用銅標準

(2μg/ml)，其計算公式為︰血漿、血清銅(μmol/L)=(A 測定/A 標準)×31.4。

有效期∶12 個月有效﹔常溫運輸，4C 保存。