葡萄糖檢測試劑盒(GOD-POD比色法)説明書

葡萄糖檢測試劑盒(GOD-POD比色法)

一、產(chǎn)品簡介：

葡萄糖(Glucose,Dextrose，Glu)又稱玉米葡糖，簡稱葡糖，化學(xué)式C6H12O6，分子量為180.16，是自然界分布廣、最重要的一種單糖，屬于多羥基醛，用酶學(xué)方法測定葡萄糖是生化檢測中的常用方法，常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法，

上述酶學(xué)法特點是：

1、靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均高；

2、使用溫和的反應(yīng)條件；

3、對葡萄糖有專一性，不受其他糖及還原物的干擾；

4、操作簡便；

5、適用于自動分析儀。

雅吉生物葡萄糖檢測試劑盒(GOD-POD比色法)又稱葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等，其檢測原理是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同時消耗溶液中的氧，產(chǎn)生的過氧化氫與氧化色原物質(zhì)反應(yīng)生成紅色的醌類化合物，初始反應(yīng)中過氧化氫的生成量與葡萄糖濃度成正比，分光光度計505nm進(jìn)行比色測定，專門用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細(xì)胞、組織等樣本中的葡萄糖含量定量測定，但不宜直接檢測尿液中的葡萄糖含量，其中Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L)=90mg/dl。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。。

二、產(chǎn)品組成：

三、自備材料：

1、生理鹽水或PBS

2、離心管或96孔板

3、勻漿機(jī)、離心機(jī)

4、水浴鍋或恒溫箱

5、分光光度計、酶標(biāo)儀、全自動或半自動生化分析儀

四、操作步驟(僅供參考)：

1、樣本處理：

①血清、血漿、腦脊液樣品：從待測樣品中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血，直接測定，如超過線性范圍(30mmol/L)，用生理鹽水或PBS稀釋后測定。

②細(xì)胞樣品：

a.取適量的細(xì)胞(一般推薦>106以上)，1000g離心10min，棄上清，留取沉淀。b.用PBS或生理鹽水清洗1~2次，1000g離心10min，棄上清，留取沉淀。

c.加入200~300μl的PBS或生理鹽水勻漿，冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞，功率300W，每次3~5s，間隔30s，重復(fù)3~5次；亦可手動勻漿，制備好的勻漿液不可離心；亦可用1~2%TritonX-100冰浴30~60min，制備好的裂解液不可離心。

③組織樣品：準(zhǔn)確稱取適量組織樣品，按質(zhì)量(g)：生理鹽水或PBS(ml)=1：9的比例，加入生理鹽水或PBS，冰浴條件下手動或機(jī)械勻漿，2500~3000g離心10min，取上清。

2、Glu測定：

①各種儀器按上表依次加入試劑。

②充分混勻,37℃水浴中孵育15min。

③立即用相應(yīng)儀器測定505nm處吸光度，以空白孔(管)調(diào)零，讀取標(biāo)準(zhǔn)孔(管)、測定孔(管)的吸光度，分別記為A_{標(biāo)準(zhǔn)}、A_測定。

機(jī)器參數(shù)：

計算：Glu(mmol/L)=A_測定/A_{標(biāo)準(zhǔn)}×5

參考區(qū)間：健康成年人空腹葡萄糖：3.9~6.1mmol/L(70~110mg/dl)

備注：Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L)=90mg/dl

性能指標(biāo)：

注意事項：

1、配制好的GOD-POD工作液，4℃避光保存，1月有效；低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降。

2、測定標(biāo)本用血清或以草酸鉀-氟化鈉抗凝的血漿(可抑制葡萄糖的分解)，可直接用于檢測腦脊液中的葡萄糖含量；待測樣品如不能及時測定應(yīng)置于2~8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定。

3、尿葡萄糖目前多采用此法進(jìn)行定量測定，但不能直接檢測，需先用班氏法對尿液樣品做半定量試驗，按測出的大概含量，用蒸餾水稀釋尿液使葡萄糖含量在3mg/ml以下，再進(jìn)行檢測，計算結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)即可，因為未經(jīng)處理的尿液中尿酸等還原性物質(zhì)的濃度較高，影響過氧化物酶反應(yīng)，可能會造成結(jié)果假性偏低。

4、隨著時間的延長，低濃度樣品亦會顯紅色，所以15min后應(yīng)及時檢測，時間不宜過久。

5、采用酶標(biāo)儀未調(diào)零情況下雅吉生物空白參考范圍在0.04~0.09之間，5mmol/L標(biāo)準(zhǔn)參考范圍在0.25~0.45之間，由于儀器設(shè)備、操作方法等不同，參考范圍會有差異。

6、該試劑盒測定下限為0.1mmol/L，測定上限為30mmol/L；以肉眼觀察，濃度≤

0.6mmol/L幾乎呈無色，濃度在0.7mmol/L即可顯淡紅色，濃度≥2.5mmol/L可顯紅色，一般情況下接近上限比接近下限更準(zhǔn)確。

7、本法線性范圍可達(dá)30mmol/L，如果樣品葡萄糖濃度過高，結(jié)果可能呈假性降低，應(yīng)用生理鹽水或PBS等稀釋后重測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

有效期：6個月有效。